Instruction Manual - Bedienungsanleitung Cast-It Gel CASTER / Cast-It Gelgießstand - VWR
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Instruction Manual – Bedienungsanleitung Cast-It™ Gel CASTER / Cast-It™ Gelgießstand
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER CONTENT WARRANTY 1 PACKAGING LIST 1 ASSEMBLING GEL PLATES FOR CASTING 2 BUFFERS AND SOLUTIONS 3 TROUBLESHOOTING 4 TECHNICAL SUPPORT AND ORDERING INFORMATION 5 VWR_v0617_E
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
WARRANTY
VWR guarantees that the system you have received has been thoroughly tested and meets its published
specification.
However, immediately upon arrival, please check carefully that the shipment is complete and has not
been damaged during transit. For missing parts or to report any kind of damage, please contact VWR
(see 'TECHNICAL SUPPORT AND ORDERING INFORMATIONS'). Please retain all packaging materials
until the delivery has been completely checked since this will speed up the return of goods if required
and reduce environmental impact. Any form of returns, replacements or credit notes must be agreed in
advance by VWR.
For the complete range of PerfectBlue™ electrophoresis and blotting systems, VWR guarantees a
warranty period of 36 months if the products have been used solely according to the instruction
manual, if not agreed differently. No liability is accepted for loss or damage arising from incorrect use.
VWR's liability is limited to the repair or replacement of the unit or refund of the purchase price, at
VWR's discretion. VWR is not liable for any consequential damages. After the warranty period has
expired VWR can offer repairs at low costs.
VWR reserves the right to alter the technical specifications of the PerfectBlue™ electrophoresis or blotting
systems without prior notice. This will enable us to implement developments as soon as they arise.
PACKAGING LIST
Unless differently agreed or marked on the delivery note the following items are included in shipment
for the Cast-It™ Gel Caster:
Casting base
Center unit with side clamps
2 casting cams
2 gaskets for the center unit (red)
2 gaskets on the casting base (black)
When using the casting base the first time remove the plastic strips from the black gaskets.
Note: Glass plates, spacers and combs are not included in the shipment and should be ordered
separately if needed!
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Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
ASSEMBLING GEL PLATES FOR CASTING
The center unit of the Cast-It™ is attached to the casting
base with safety cams and slot arrangement.
For casting gels remove the center unit from the base.
Invert casting base (picture 1).
Place the center of the Cast-It™ on the inverted casting
base. The notches of the center unit need to lock into
the four acrylic squares on the underside of the casting Picture 1: Invert casting base.
base. Arrange a gel assembly including a notched
glass plate, side spacers and a blank glass plate. Place
the assembly onto one side of the center unit. Slide the
side clamps over the assembly and tighten the screws
(picture 2). DO NOT OVERTIGHTEN. Place a second
gel assembly on the other side. If you only want to cast
one gel, place a blank glass plate or a blocking plate,
on the other side. The bottom of the glass plates needs
to sit flat on the acrylic squares of the inverted casting
base to obtain a good seal. Remove the center unit and
turn around the casting base. Picture 2: Place gel assembly.
Wet silicone mats with e.g. water or buffer to prolong
their life span.
Place the center unit onto the casting base. Insert the
casting cams (with handles pointing up) into the holes
in the center unit. Simultaneously, turn cams one half
turn to tighten the assembly onto the gasket of the
casting base.
Once the glass plates are secured into the casting base
the gel may be poured. (An initial leak test using a
small amount of water is recommended - add 2 - 3 ml
Picture 3: Turn handles.
of water and let stand for 2 minutes. If no leakage is
visible, remove water and proceed with gel casting. If
leakage occurs, take assembly apart and try again.)
See Table 1 for volumes of acrylamide mixture needed. Pour gel solution slowly to avoid any
bubbles. When gel is poured place comb at top to create wells.
Remove gels from the Cast-It™ center unit and place them into the electrophoresis chamber.
Table 1:
Unit Twin S Twin M Twin ExW S Twin L
0.8 mm spacer 8 ml 18 ml 16 ml 32 ml
1.5 mm spacer 15 ml 34 ml 30 ml 60 ml
VWR_v0617_E 2
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
A few tips about caring for your system:
Clean all VWR acrylic systems with warm water and a mild detergent. Do not autoclave, bake or
microwave your unit. Temperatures over 50 °C can cause damage to the acrylic.
Always wet silicone mats with e.g. water or buffer before placing the center unit.
WARNING! DO NOT USE ETHANOL OR OTHER ORGANIC SOLVENTS TO CLEAN VWR PER-
FECTBLUE™ PRODUCTS. Organic solvents cause acrylic to 'craze' or crack.
BUFFERS AND SOLUTIONS
1 x Tris-Glycine electrophoresis buffer
25 mM Tris
250 mM glycine (electrophoresis grade) pH 8.3
0.1 % SDS
Prepare a 5 x stock solution of electrophoresis buffer by dissolving 15.1 g Tris base and 94 g glycine in
900 ml of deionized H2O. Add 50 ml of a 10 % stock solution of SDS (electrophoresis grade) and
adjust the volume to 1000 ml with H2O.
Resolving Gels for Tris-Glycine SDS-PAGE
6% 8% 10 % 12 % 15 %
H2O 5.3 4.6 4.0 3.3 2.3
30 % acrylamide mix 2.0 2.7 3.3 4.0 5.0
1.5 mM Tris (pH 8.8) 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
10 % SDS 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
10 % ammonium persulfate 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
TEMED 0.008 0.006 0.004 0.004 0.004
All amounts in ml per 10 ml gel solution
5 % Stacking Gels for Tris-Glycine SDS-PAGE
1 ml 2 ml 3 ml 5 ml 10 ml
H2O 0.68 1.4 2.1 3.4 6.8
30 % acrylamide mix 0.17 0.33 0.5 0.83 1.7
1.0 mM Tris (pH 6.8) 0.13 0.25 0.38 0.63 1.25
10 % SDS 0.01 0.02 0.03 0.05 0.1
10 % ammonium persulfate 0.01 0.02 0.03 0.05 0.1
TEMED 0.001 0.002 0.003 0.005 0.01
All amounts in ml
VWR_v0617_E 3
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
TROUBLESHOOTING
Below are some possible solutions to potential problems. If these suggestions are unsuccessful, do not
hesitate to contact us (see 'TECHNICAL SUPPORT AND ORDERING INFORMATIONS').
Problem Cause Solution
Leakage of gel Glass plates and spacers have For correct alignment of glass plate sandwich it is necessary
solution not been aligned correctly to place the upper buffer chamber on top of the inverted
casting base. The bottom of the glass plates and the spacers
need to sit flat on the acrylic squares.
Glass plates or spacers are Clean thoroughly.
dirty
Uneven edges of glass plates Only use glass plates with polished edges.
Silicone gaskets of casting Clean thoroughly with a mild detergent and rinse with
base are dirty distilled water, dry without leaving smearing, i.e. air dry with
a non-smearing paper or washleather.
Silicone gaskets of casting Replace silicone gaskets which can be easily removed. New
base are brittle gaskets will stick due to their own adherence. Also, wet
silicone mats with e.g. water or buffer before placing the
center unit onto the casting base to prolong their life span.
Skewed bands Gel has not polymerized De-gas gel solution before casting and increase APS and
properly at wells. TEMED concentrations. The comb can be wiped with TEMED
just prior to casting to improve polymerization.
Resolving gel is uneven at top. Overlay gel carefully using water saturated n-butanol and
make sure casting stand is level.
The upper buffer chamber is Check gel to make sure that it is a solid slab inside the glass
leaking either through the gel and check the setup of the apparatus to ensure a seal with
or along the side spacers. the gasket. Always use combs and spacers of the same
thickness.
'Frowning' of Leakage of buffer along sides Do not move spacer after polymerisation of gel. Make sure
outside lanes or along spacers inside the gel that the glass plates are pressed firmly against the gasket of
assembly. the UBC.
Silicone mats wear Sticky surface of the mats Wet the silicone mats with e.g. water or buffer before placing
out quickly adheres too strongly to the UBC onto the casting base to prolong their life span.
glass plates. Upon removal of
the center unit silicone mats
are torn apart.
VWR_v0617_E 4
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
TECHNICAL SUPPORT AND ORDERING INFORMATION
For technical questions and more detailed information on VWR’s products please visit www.de.vwr.com
to find the respective contact person.
Power Supplies
Do not hesitate to contact us for advice on which Power Supply is most suitable for your application.
PerfectBlue™ Double Gel System Twin S
Item Description Cat. No.
Double gel system Twin S system for gels 10 x 10 cm (W x L), without casting base PEQL45-1010-I
system for gels 10 x 10 cm (W x L), with casting base PEQL45-1010-C
Casting base S including silicone gaskets and cams PEQL45-1010-CB
Cast-It™ S gel caster complete system for sealing up to 2 gels PEQL45-1010-CU
Silicone gaskets 2 replacement silicone gaskets for Casting base S PEQL45-1010-CG
Replacement gaskets 2 replacement gaskets for upper buffer chamber S PEQL45-1010-GK
Side clamps 2 side clamps for fixation of glass plates PEQL45-1010-CL
Wing screws 2 wing screws for fixation of side clamps PEQL45-1010-WK
Notched glass plate clear, 10 x 10 x 0.24 cm PEQL45-1010-10R
Blank glass plate clear, 10 x 10 x 0.24 cm PEQL45-1010-10G
Notched alumina plate white, 10 x 10 x 0.10 cm PEQL45-1010-10RA
Standard combs 1.5 mm 6 teeth 175 µl* PEQL45-1010-6D
1.5 mm 8 teeth 120 µl* PEQL45-1010-8D
1.5 mm 10 teeth 90 µl* PEQL45-1010-10D
1.5 mm 12 teeth 70 µl* PEQL45-1010-12D
0.8 mm 6 teeth 95 µl* PEQL45-1010-6C
0.8 mm 8 teeth 65 µl* PEQL45-1010-8C
0.8 mm 10 teeth 50 µl* PEQL45-1010-10C
0.8 mm 12 teeth 35 µl* PEQL45-1010-12C
Preparative combs 1.5 mm 2 teeth 1490/105 µl* PEQL45-1010-PD
0.8 mm 2 teeth 795/56 µl* PEQL45-1010-PC
SpacerPlacer Facilitates the correct alignment of Spacers PEQL45-1010-SP
Spacer Sets 1.5 mm 0.7 cm wide 3 pieces PEQL45-1010-SD
(2 side & 1 bottom spacer) 0.8 mm 0.7 cm wide 3 pieces PEQL45-1010-SC
* volumes are calculated for a well length of 14 mm
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Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
PerfectBlue™ Double Gel System Twin M
Item Description Cat. No.
Double gel system Twin M system for gels 16 x 14 cm (W x L), without casting base PEQL45-1614-I
system for gels 16 x 14 cm (W x L), with casting base PEQL45-1614-C
Casting base M including silicone gaskets and cams PEQL45-1614-CB
Cast-It™ M gel caster complete system for sealing up to 2 gels PEQL45-1614-CU
Silicone gaskets 2 replacement silicone gaskets for Casting base M PEQL45-1614-CG
Replacement gaskets 2 replacement gaskets for upper buffer chamber M PEQL45-1614-GK
Side clamps 2 side clamps for fixation of glass plates PEQL45-1614-CL
Wing screws 2 wing screws for fixation of side clamps PEQL45-1010-WK
Notched glass plate clear, 16 x 14 x 0.32 cm PEQL45-1614-14R
Blank glass plate clear, 16 x 14 x 0.32 cm PEQL45-1614-14G
Standard combs 1.5 mm 10 teeth 234 µl* PEQL45-1614-10D
1.5 mm 15 teeth 140 µl* PEQL45-1614-15D
1.5 mm 20 teeth 90 µl* PEQL45-1614-20D
1.5 mm 24 teeth 65 µl* PEQL45-1614-24D
0.8 mm 10 teeth 125 µl* PEQL45-1614-10C
0.8 mm 15 teeth 75 µl* PEQL45-1614-15C
0.8 mm 20 teeth 50 µl* PEQL45-1614-20C
0.8 mm 24 teeth 35 µl* PEQL45-1614-24C
Preparative combs 1.5 mm 2 teeth 3570/150 µl* PEQL45-1614-PD
0.8 mm 2 teeth 1900/80 µl* PEQL45-1614-PC
SpacerPlacer Facilitates the correct alignment of Spacers PEQL45-1010-SP
Spacer Sets 1.5 mm 1.0 cm wide 3 pieces PEQL45-1614-SD
(2 side & 1 bottom spacer) 0.8 mm 1.0 cm wide 3 pieces PEQL45-1614-SC
* volumes are calculated for a well length of 20 mm
PerfectBlue™ Double Gel System Twin L
Item Description Cat. No.
Double gel system Twin L system for gels 20 x 20 cm (W x L), without casting base PEQL45-2020-I
system for gels 20 x 20 cm (W x L), with casting base PEQL45-2020-C
Casting base L including silicone gaskets and cams PEQL45-2020-CB
Cast-It™ L gel caster complete system for sealing up to 2 gels PEQL45-2020-CU
Silicone gaskets 2 replacement silicone gaskets for Casting base L PEQL45-2020-CG
Replacement gaskets 2 replacement gaskets for upper buffer chamber L PEQL45-2020-GK
Side clamps 2 side clamps for fixation of glass plates PEQL45-2020-CL
Wing screws 2 wing screws for fixation of side clamps PEQL45-1010-WK
Notched glass plate clear, 20 x 20 x 0.32 cm PEQL45-2020-20R
Blank glass plate clear, 20 x 20 x 0.32 cm PEQL45-2020-20G
Standard combs 1.5 mm 10 teeth 305 µl* PEQL45-2020-10D
1.5 mm 15 teeth 185 µl* PEQL45-2020-15D
1.5 mm 20 teeth 125 µl* PEQL45-2020-20D
1.5 mm 25 teeth 90 µl* PEQL45-2020-25D
0.8 mm 10 teeth 165 µl* PEQL45-2020-10C
0.8 mm 15 teeth 100 µl* PEQL45-2020-15C
0.8 mm 20 teeth 65 µl* PEQL45-2020-20C
0.8 mm 25 teeth 50 µl* PEQL45-2020-25C
Preparative combs 1.5 mm 2 teeth 3330/110 µl* PEQL45-2020-PD
0.8 mm 2 teeth 1776/59 µl* PEQL45-2020-PC
SpacerPlacer Facilitates the correct alignment of Spacers PEQL45-1010-SP
Spacer Sets 1.5 mm 1.0 cm wide 3 pieces PEQL45-2020-SD
(2 side & 1 bottom spacer) 0.8 mm 1.0 cm wide 3 pieces PEQL45-2020-SC
* volumes are calculated for a well length of 20 mm
VWR_v0617_E 6
Instruction Manual Cast-It™ Gel CASTER
PerfectBlue™ Double Gel System Twin ExW S
Item Description Cat. No.
Double gel system system for gels 20 x 10 cm (W x L), without casting base PEQL45-2010-I
Twin ExW S system for gels 20 x 10 cm (W x L), with casting base PEQL45-2010-C
Casting base ExW including silicone gaskets and cams PEQL45-2010-CB
Cast-It™ ExW S gel caster complete system for sealing up to 2 gels PEQL45-2010-CU
Silicone gaskets 2 replacement silicone gaskets for Casting base ExW S PEQL45-2010-CG
Replacement gaskets 2 replacement gaskets for upper buffer chamber ExW S PEQL45-2010-GK
Side clamps 2 side clamps for fixation of glass plates PEQL45-2010-CL
Wing screws 2 wing screws for fixation of side clamps PEQL45-1010-WK
Notched glass plate clear, 20 x 10 x 0.30 cm PEQL45-2010-10R
Blank glass plate clear, 20 x 10 x 0.30 cm PEQL45-2010-10G
Standard combs 1.5 mm 10 teeth 305 µl* PEQL45-2010-10D
1.5 mm 15 teeth 185 µl* PEQL45-2010-15D
1.5 mm 20 teeth 125 µl* PEQL45-2010-20D
1.5 mm 25 teeth 90 µl* PEQL45-2010-25D
0.8 mm 10 teeth 165 µl* PEQL45-2010-10C
0.8 mm 15 teeth 100 µl* PEQL45-2010-15C
0.8 mm 20 teeth 65 µl* PEQL45-2010-20C
0.8 mm 25 teeth 50 µl* PEQL45-2010-25C
Micro titer combs 1.5 mm 18 teeth 105 µl* PEQL45-2010-MTD
1.5 mm 36 teeth 50 µl* PEQL45-2010-MTC
0.8 mm 18 teeth 55 µl* PEQL45-2010-MT2D
0.8 mm 36 teeth 25 µl* PEQL45-2010-MT2C
Preparative combs 1.5 mm 2 teeth 3330/110 µl* PEQL45-2010-PD
0.8 mm 2 teeth 1776/59 µl* PEQL45-2010-PC
SpacerPlacer Facilitates the correct alignment of Spacers PEQL45-1010-SP
Spacer Sets 1.5 mm 1.2 cm wide 3 pieces PEQL45-2010-SD
(2 side & 1 bottom spacer) 0.8 mm 1.2 cm wide 3 pieces PEQL45-2010-SC
* volumes are calculated for a well length of 14 mm
VWR_v0617_E 7Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand INHALT GARANTIE 9 LIEFERUMFANG 9 ZUSAMMENBAU DER GLASPLATTEN ZUM GIEßEN 10 PUFFER UND LÖSUNGEN 11 TROUBLESHOOTING 12 TECHNISCHER SERVICE UND BESTELLINFORMATIONEN 13 VWR_v0617_D 8
Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
GARANTIE
VWR garantiert, dass das ausgelieferte System genauestens geprüft wurde und den geltenden
Anforderungen entspricht.
Bitte überprüfen Sie die Lieferung dennoch umgehend nach Erhalt auf Vollständigkeit und eventuelle
Transportschäden. Sollte die Lieferung beschädigt oder fehlerhaft sein, wenden Sie sich bitte umgehend
an den Technischen Service von VWR oder Ihren VWR-Außendienstmitarbeiter (siehe 'TECHNISCHER
SERVICE & BESTELLINFORMATIONEN'). Durch die Aufbewahrung des Verpackungs-materials bis zur
vollständigen Prüfung der Lieferung wird die Umwelt geschont und eine evtl. Rückholung beschleunigt.
Alle Rücksendungen, Austauschlieferungen und Gutschriften müssen zuvor von VWR freigegeben
werden.
Auf sämtliche PerfectBlue™ Elektrophorese- und Blottingssysteme gewährt VWR 36 Monate Garantie,
sofern die Systeme ausschließlich der Bedienungsanleitung entsprechend verwendet wurden und keine
anderslautende Vereinbarung besteht. Ansprüche auf Ersatz oder Reparatur, die aus einer fehlerhaften
Verwendung entstanden sind, werden nicht erfüllt. Die VWR GmbH verpflichtet sich zur Reparatur oder
dem Ersatz des Gerätes bzw. der Rückerstattung des Kaufpreises nach ihren Bedingungen. VWR haftet
nicht für Folgeschäden, die aus der Verwendung des Systems entstanden sind. Nach Ablauf der
Garantiezeit können defekte PerfectBlue™ Elelektrophorese- oder Blotting-Systeme durch VWR
kostengünstig repariert werden.
Um Neuentwicklungen zeitnah einführen zu können, behält es sich VWR vor, technische Details ohne
Vorankündigung zu ändern.
LIEFERUMFANG
Sofern nicht anders vereinbart bzw. auf dem Lieferschein angegeben, enthält der Lieferumfang des
Cast-It™ Gelgießstandes folgende Komponenten:
Gießbasis
Mittelteil mit Seitenklemmen
2 Nockenhebel
2 Dichtungen für das Mittelteil (rot)
2 Dichtungen auf der Gießbasis (schwarz)
Entfernen Sie bei erstmaliger Verwendung der Gießbasis die Plastikstreifen von den schwarzen
Dichtungen.
Hinweis: Glasplatten, Spacer und Kämme sind nicht im Lieferumfang enthalten uns müssen bei Bedarf
separat bestellt werden!
VWR_v0617_D 9Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand ZUSAMMENBAU DER GLASPLATTEN ZUM GIEßEN Das Mittelteil des Cast-It™ Gießstandes ist über Sicher- heitsdichtungen und ein Stift/Nut-Prinzip mit der Gießbasis verbunden. Entfernen Sie zum Gießen der Gele das Mittelteil aus der Gießbasis. Invertieren Sie die Gießbasis (Abbildung 1). Platzieren Sie das Mittelteil auf der invertierten Abbildung 1: Invertieren der Gießbasis. Gießbasis. Die Aussparungen des Mittelteils müssen in die vier Acrylglasquader auf der Unterseite der Gießbasis einrasten. Bauen Sie ein Gelsandwich aus 2 Seitenspacern, einer normalen und einer ausgeschnittenen Glasplatte zusammen. Platzieren Sie den Aufbau auf einer Seite des Mittelteils. Schieben Sie die Seitenklemmen über den Aufbau und ziehen Sie die Schrauben fest (Abbildung 2). NICHT ÜBERDREHEN. Platzieren Sie einen zweiten Gelaufbau auf der anderen Seite. Wenn Sie nur ein Gel gießen möchten, setzen Sie auf der anderen Seite eine Blindplatte ein. Die Unterkante Abbildung 2: Platzieren des Gelaufbaus. der Glasplatten muss eben auf den Acrylglasquadern der invertierten Gießbasis aufsitzen, um eine gute Abdichtung zu erreichen. Entfernen Sie das Mittelteil und drehen Sie die Gießbasis um. Befeuchten Sie die Silikondichtungen mit Wasser oder Puffer, um deren Lebenszeit zu erhöhen. Platzieren Sie das Mittelteil auf der Gießbasis. Setzen Sie die Nockenhebel (mit dem Griff nach oben zeigend) in die Aussparungen des Mittelteils. Drehen Sie die Nockenhebel synchron um eine halbe Umdrehung, um den Aufbau auf der Gießbasis abzudichten. Abbildung 3: Drehen der Nockenhebel. Sobald die Glasplatten in der Gießbasis fest fixiert sind, kann das Gel gegossen werden. (Es empfiehlt sich, vor dem Gelgießen das System auf seine Dichtheit zu überprüfen. Geben Sie 2 – 3 ml Wasser zwischen die Glasplatten und lassen es 2 Minuten stehen. Wenn kein Auslaufen erkennbar ist, entfernen Sie das Wasser und fahren mit dem Gießen des Gels fort. Wenn ein Wasseraustritt erfolgt, nehmen Sie den Aufbau auseinander und versuchen es erneut.) Siehe Tabelle 1 für die benötigten Acrylamid-Mix-Volumina. Gießen Sie die Gellösung langsam, um eine Luftblasenbildung zu vermeiden. Sobald das Gel gegossen ist, wird ein Kamm von oben zwischen die Glasplatten gesteckt, damit sich die Taschen bilden können. Entfernen Sie die Gele aus dem Cast-It™ Mittelteil und setzen Sie sie in die Elektrophoresekammer ein. Tabelle 1: System Twin S Twin M Twin ExW S Twin L 0.8 mm Spacer 8 ml 18 ml 16 ml 32 ml 1.5 mm Spacer 15 ml 34 ml 30 ml 60 ml VWR_v0617_D 10
Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
Einige Hinweise zur Pflege Ihres Systems:
Die Reinigung aller VWR Acrylsysteme sollte mit warmen Wasser und einem milden Reinigungsmittel
erfolgen. Das System darf nicht autoklaviert, gebacken oder in der Mikrowelle erhitzt werden.
Temperaturen über 50 °C können das Acryl schädigen. Befeuchten Sie immer die Silikondichtungen mit
Wasser oder Puffer, bevor Sie das Mittelteil aufsetzen.
ACHTUNG! ZUR REINIGUNG DER VWR PERFECTBLUE™ PRODUKTE DÜRFEN WEDER ETHANOL
NOCH ANDERE ORGANISCHE LÖSUNGSMITTEL VERWENDET WERDEN. Organische Lösungsmittel
können Risse und Sprünge im Acrylglas verursachen.
PUFFER UND LÖSUNGEN
1 x Tris-Glycin Elektrophoresepuffer
25 mM Tris
250 mM Glycin (Elektrophoresegrad) pH 8.3
0.1 % SDS
Bereiten Sie eine 5 x Stammlösung des Elektrophoresepuffers vor, indem Sie 15.1 g Tris und
94 g Glycin in 900 ml deionisiertem H2O auflösen. Fügen Sie 50 ml einer 10 % SDS-Stammlösung
(Elektrophoresegrad) hinzu und adjustieren Sie das Volumen auf 1000 ml mit H2O.
Trenngele für Tris-Glycin SDS-PAGE
6% 8% 10 % 12 % 15 %
H2O 5.3 4.6 4.0 3.3 2.3
30 % Acrylamid-Mix 2.0 2.7 3.3 4.0 5.0
1.5 mM Tris (pH 8.8) 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
10 % SDS 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
10 % Ammoniumpersulfat 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
TEMED 0.008 0.006 0.004 0.004 0.004
Alle Mengenangaben in ml für 10 ml Gellösung
5 % Sammelgele für Tris-Glycin SDS-PAGE
1 ml 2 ml 3 ml 5 ml 10 ml
H2O 0.68 1.4 2.1 3.4 6.8
30 % Acrylamid-Mix 0.17 0.33 0.5 0.83 1.7
1.0 mM Tris (pH 6.8) 0.13 0.25 0.38 0.63 1.25
10 % SDS 0.01 0.02 0.03 0.05 0.1
10 % Ammoniumpersulfat 0.01 0.02 0.03 0.05 0.1
TEMED 0.001 0.002 0.003 0.005 0.01
Alle Mengenangaben in ml
VWR_v0617_D 11Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
TROUBLESHOOTING
Hier finden Sie passende Lösungen zu möglichen Problemen. Sollten Sie weitere Fragen haben, wird
Ihnen das VWR-Service-Team gerne weiterhelfen (TECHNISCHER SERVICE & BESTELLINFORMA- TI-
ONEN).
Problem Ursache Lösung
Gellösung läuft aus Glasplatten und Spacer Beim Einspannen des Glasplattensandwichs muss das
wurden nicht korrekt justiert Mittelteil unbedingt auf die invertierte Gießbasis gestellt
werden. Glasplatten und Spacer müssen vollständig auf den
Acrylglasquadern der invertierten Gießbasis aufsitzen.
Glasplatten und Spacer sind Reinigen Sie Glasplatten und Spacer vor der Verwendung
verschmutzt gründlich.
Die Ränder der Glasplatten Achten Sie darauf, dass insbesondere die untere
sind uneben Glasplattenkante gerade und abgeschliffen ist, damit sie
optimal durch die Silikongummimatte der Gießbasis
abgedichtet wird.
Silikongummimatten der Die Silikongummimatten sollten gründlich mit einem milden
Gießbasis sind verschmutzt Reinigungsmittel gereinigt, mit destilliertem Wasser abgespült
und fusselfrei getrocknet werden; z. B. an der Luft mit
fusselfreiem Papier oder Fensterleder.
Silikonmatten der Gießbasis Erneuern Sie die Silikonmatten, welche lediglich aufgrund
sind spröde ihrer eigenen Klebkraft auf der Gießbasis sitzen und somit
ohne Aufwand ab- und aufgesetzt werden können. Bitte
beachten Sie, dass das Anfeuchten der Dichtungen mit
Wasser oder Puffer vor dem Aufsetzen des Mittelteils deren
Lebenszeit deutlich erhöht.
Verzerrte Banden Gel war an den Taschen noch Entgasen Sie die Gellösung vor dem Gießen und erhöhen Sie
nicht vollständig polymerisiert die APS- und TEMED-Konzentrationen. Der Kamm kann
vorher mit TEMED abgewischt werden, um die Polymerisa-
tion zu verbessern.
Keine gerade Oberkante des Überschichten Sie das Trenngel im Anschluss an das Gießen
Trenngels vorsichtig mit N-Butanol oder Wasser.
Puffer des oberen Das Gel muss vollständig auspolymerisieren. Das
Pufferreservoirs läuft durch Glasplattensandwich muss fest genug in den Seitenklemmen
das Gel oder entlang der sitzen. Verwenden Sie immer Kämme und Spacer gleicher
Spacer aus Stärke.
Verzerrte Banden Auslaufen des Puffers an den Die Spacer sollten nach der Polymerisation nicht mehr
in den äußeren Seiten oder durch die Spacer bewegt werden. Die Glasplatten müssen fest an die
Spuren innerhalb des Gelaufbaus Gummidichtungen des Mittelteils gedrückt sein.
Silikondichtungen Glasplatten kleben zu stark an Feuchten Sie die Silikondichtungen mit Wasser oder Puffer
der Gießbasis den Dichtungen und an, bevor Sie das Mittelteil auf die Gießbasis setzen. Dies
nutzen sich schnell strapazieren diese beim erhöht die Lebenszeit der Dichtungen deutlich.
ab Abnehmen des Mittelteils
VWR_v0617_D 12Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
TECHNISCHER SERVICE UND BESTELLINFORMATIONEN
Bei technischen Fragen kontaktieren Sie uns bitte unter +49 (0)9131 610 7020 oder per e-mail an
info.peqlab@vwr.com. Ausführliche Informationen zu unseren Produkten finden Sie in unserem
aktuellen Produktkatalog, den wir Ihnen auf Wunsch gerne zusenden oder unter www.de.vwr.com.
Power Supplies
Bei Bedarf beraten wir Sie gerne ausführlich, welcher Power Supply für Ihre Anwendung geeignet ist.
PerfectBlue™ Doppelgelsystem Twin S
Artikel Beschreibung Bestell-Nr.
Doppelgelsystem Twin S System für Gele 10 x 10 cm (B x L), ohne Gießbasis PEQL45-1010-I
System für Gele 10 x 10 cm (B x L), mit Gießbasis PEQL45-1010-C
Gießbasis S komplett mit Dichtgummis und Nockenhebeln PEQL45-1010-CB
Gelgießstand Cast-It™ S vollständiges System zum Abdichten von bis zu 2 Gelen PEQL45-1010-CU
Silikonmatten 2 Ersatz-Silikonmatten für Gießbasis S PEQL45-1010-CG
Ersatzdichtungen 2 Ersatz-Gummidichtungen für Mittelteil S PEQL45-1010-GK
Seitenklemmen 2 Seitenklemmen zum Befestigen der Gelplatten PEQL45-1010-CL
Flügelschrauben 2 Flügelschrauben zum Fixieren der Seitenklemmen PEQL45-1010-WK
Glasplatte, ausgeschnitten Farbe klar, Maße (B x L x D) 10 x 10 x 0.24 cm PEQL45-1010-10R
Glasplatte, normal Farbe klar, Maße (B x L x D) 10 x 10 x 0.24 cm PEQL45-1010-10G
Ceramplatte, ausgeschnitten Farbe weiß, Maße (B x L x D) 10 x 10 x 0.10 cm PEQL45-1010-10RA
Standardkämme 1.5 mm 6 Zähne 175 µl* PEQL45-1010-6D
1.5 mm 8 Zähne 120 µl* PEQL45-1010-8D
1.5 mm 10 Zähne 90 µl* PEQL45-1010-10D
1.5 mm 12 Zähne 70 µl* PEQL45-1010-12D
0.8 mm 6 Zähne 95 µl* PEQL45-1010-6C
0.8 mm 8 Zähne 65 µl* PEQL45-1010-8C
0.8 mm 10 Zähne 50 µl* PEQL45-1010-10C
0.8 mm 12 Zähne 35 µl* PEQL45-1010-12C
Präparativer Kamm 1.5 mm 2 Zähne 1490/105 µl* PEQL45-1010-PD
0.8 mm 2 Zähne 795/56 µl* PEQL45-1010-PC
'SpacerPlacer' Erleichtert das Ausrichten der Spacer PEQL45-1010-SP
Spacer-Sets 1.5 mm 0.7 cm breit 3 Stück PEQL45-1010-SD
(2 Seiten- & 1 Bodenspacer) 0.8 mm 0.7 cm breit 3 Stück PEQL45-1010-SC
* Taschenvolumen ist kalkuliert für eine Taschentiefe von 14 mm
VWR_v0617_D 13Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
PerfectBlue™ Doppelgelsystem Twin M
Artikel Beschreibung Bestell-Nr.
Doppelgelsystem Twin M System für Gele 16 x 14 cm (B x L), ohne Gießbasis PEQL45-1614-I
System für Gele 16 x 14 cm (B x L), mit Gießbasis PEQL45-1614-C
Gießbasis M komplett mit Dichtgummis und Nockenhebeln PEQL45-1614-CB
Gelgießstand Cast-It™ M vollständiges System zum Abdichten von bis zu 2 Gelen PEQL45-1614-CU
Silikonmatten 2 Ersatz-Silikonmatten für Gießbasis M PEQL45-1614-CG
Ersatzdichtungen 2 Ersatz-Gummidichtungen für Mittelteil M PEQL45-1614-GK
Seitenklemmen 2 Seitenklemmen zum Befestigen der Gelplatten PEQL45-1614-CL
Flügelschrauben 2 Flügelschrauben zum Fixieren der Seitenklemmen PEQL45-1010-WK
Glasplatte, ausgeschnitten Farbe klar, Maße (B x L x D) 16 x 14 x 0.32 cm PEQL45-1614-14R
Glasplatte, normal Farbe klar, Maße (B x L x D) 16 x 14 x 0.32 cm PEQL45-1614-14G
Standardkämme 1.5 mm 10 Zähne 234 µl* PEQL45-1614-10D
1.5 mm 15 Zähne 140 µl* PEQL45-1614-15D
1.5 mm 20 Zähne 90 µl* PEQL45-1614-20D
1.5 mm 24 Zähne 65 µl* PEQL45-1614-24D
0.8 mm 10 Zähne 125 µl* PEQL45-1614-10C
0.8 mm 15 Zähne 75 µl* PEQL45-1614-15C
0.8 mm 20 Zähne 50 µl* PEQL45-1614-20C
0.8 mm 24 Zähne 35 µl* PEQL45-1614-24C
Präparativer Kamm 1.5 mm 2 Zähne 3570/150 µl* PEQL45-1614-PD
0.8 mm 2 Zähne 1900/80 µl* PEQL45-1614-PC
'SpacerPlacer' Erleichtert das Ausrichten der Spacer PEQL45-1614-SP
Spacer-Sets 1.5 mm 1.0 cm breit 3 Stück PEQL45-1614-SD
(2 Seiten- & 1 Bodenspacer) 0.8 mm 1.0 cm breit 3 Stück PEQL45-1614-SC
* Taschenvolumen ist kalkuliert für eine Taschentiefe von 20 mm
PerfectBlue™ Doppelgelsystem Twin L
Artikel Beschreibung Bestell-Nr.
Doppelgelsystem Twin L System für Gele 20 x 20 cm (B x L), ohne Gießbasis PEQL45-2020-I
System für Gele 20 x 20 cm (B x L), mit Gießbasis PEQL45-2020-C
Gießbasis L komplett mit Dichtgummis und Nockenhebeln PEQL45-2020-CB
Gelgießstand Cast-It™ L vollständiges System zum Abdichten von bis zu 2 Gelen PEQL45-2020-CU
Silikonmatten 2 Ersatz-Silikonmatten für Gießbasis L PEQL45-2020-CG
Ersatzdichtungen 2 Ersatz-Gummidichtungen für Mittelteil L PEQL45-2020-GK
Seitenklemmen 2 Seitenklemmen zum Befestigen der Gelplatten PEQL45-2020-CL
Flügelschrauben 2 Flügelschrauben zum Fixieren der Seitenklemmen PEQL45-1010-WK
Glasplatte, ausgeschnitten Farbe klar, Maße (B x L x D) 20 x 20 x 0.32 cm PEQL45-2020-20R
Glasplatte, normal Farbe klar, Maße (B x L x D) 20 x 20 x 0.32 cm PEQL45-2020-20G
Standardkämme 1.5 mm 10 Zähne 305 µl* PEQL45-2020-10D
1.5 mm 15 Zähne 185 µl* PEQL45-2020-15D
1.5 mm 20 Zähne 125 µl* PEQL45-2020-20D
1.5 mm 25 Zähne 90 µl* PEQL45-2020-25D
0.8 mm 10 Zähne 165 µl* PEQL45-2020-10C
0.8 mm 15 Zähne 100 µl* PEQL45-2020-15C
0.8 mm 20 Zähne 65 µl* PEQL45-2020-20C
0.8 mm 25 Zähne 50 µl* PEQL45-2020-25C
Präparativer Kamm 1.5 mm 2 Zähne 3330/110 µl* PEQL45-2020-PD
0.8 mm 2 Zähne 1776/59 µl* PEQL45-2020-PC
'SpacerPlacer' Erleichtert das Ausrichten der Spacer PEQL45-2020-SP
Spacer-Sets 1.5 mm 1.0 cm breit 3 Stück PEQL45-2020-SD
(2 Seiten- & 1 Bodenspacer) 0.8 mm 1.0 cm breit 3 Stück PEQL45-2020-SC
* Taschenvolumen ist kalkuliert für eine Taschentiefe von 20 mm
VWR_v0617_D 14Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand
PerfectBlue™ Doppelgelsystem Twin ExW S
Artikel Beschreibung Bestell-Nr.
Doppelgelsystem Twin ExW S System für Gele 20 x 10 cm (B x L), ohne Gießbasis PEQL45-2010-I
System für Gele 20 x 10 cm (B x L), mit Gießbasis PEQL45-2010-C
Gießbasis ExW komplett mit Dichtgummis und Nockenhebeln PEQL45-2010-CB
Gelgießstand Cast-It™ ExW S vollständiges System zum Abdichten von bis zu 2 Gelen PEQL45-2010-CU
Silikonmatten 2 Ersatz-Silikonmatten für Gießbasis ExW S PEQL45-2010-CG
Ersatzdichtungen 2 Ersatz-Gummidichtungen für Mittelteil ExW S PEQL45-2010-GK
Seitenklemmen 2 Seitenklemmen zum Befestigen der Gelplatten PEQL45-2010-CL
Flügelschrauben 2 Flügelschrauben zum Fixieren der Seitenklemmen PEQL45-1010-WK
Glasplatte, ausgeschnitten Farbe klar, Maße (B x L x D) 20 x 10 x 0.30 cm PEQL45-2010-10R
Glasplatte, normal Farbe klar, Maße (B x L x D) 20 x 10 x 0.30 cm PEQL45-2010-10G
Standardkämme 1.5 mm 10 Zähne 305 µl* PEQL45-2010-10D
1.5 mm 15 Zähne 185 µl* PEQL45-2010-15D
1.5 mm 20 Zähne 125 µl* PEQL45-2010-20D
1.5 mm 25 Zähne 90 µl* PEQL45-2010-25D
0.8 mm 10 Zähne 165 µl* PEQL45-2010-10C
0.8 mm 15 Zähne 100 µl* PEQL45-2010-15C
0.8 mm 20 Zähne 65 µl* PEQL45-2010-20C
0.8 mm 25 Zähne 50 µl* PEQL45-2010-25C
Mikrotiterkämme 1.5 mm 18 Zähne 105 µl* PEQL45-2010-MTD
1.5 mm 36 Zähne 50 µl* PEQL45-2010-MTC
0.8 mm 18 Zähne 55 µl* PEQL45-2010-MT2D
0.8 mm 36 Zähne 25 µl* PEQL45-2010-MT2C
Präparativer Kamm 1.5 mm 2 Zähne 3330/110 µl* PEQL45-2010-PD
0.8 mm 2 Zähne 1776/59 µl* PEQL45-2010-PC
'SpacerPlacer' Erleichtert das Ausrichten der Spacer PEQL45-2010-SP
Spacer-Sets 1.5 mm 1.2 cm breit 3 Stück PEQL45-2010-SD
(2 Seiten- & 1 Bodenspacer) 0.8 mm 1.2 cm breit 3 Stück PEQL45-2010-SC
* Taschenvolumen ist kalkuliert für eine Taschentiefe von 14 mm
VWR_v0617_D 15Bedienungsanleitung Cast-It™ Gelgießstand NOTIZEN VWR_v0617_D 16
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